液相色譜因流動(dòng)相引起的常見(jiàn)問(wèn)題

更新更新時(shí)間：2021-08-16

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上海連橋生物科技有限公司

一些因流動(dòng)相引起的常見(jiàn)問(wèn)題

流動(dòng)相脫氣不充分

流動(dòng)相受熱，或者流動(dòng)相不同組分混合時(shí)會(huì )有氣體產(chǎn)生，氣泡進(jìn)入泵內引起壓力波動(dòng)，增加噪音，色譜圖上出現毛刺?？稍囉孟铝蟹椒ń鉀Q問(wèn)題：流動(dòng)相再脫氣；采用更有效的脫氣方法或兩種方法配合使用；改系統內混合為系統外預混合。

流動(dòng)相供給不暢

流動(dòng)相用完，管道中吸入氣體引起泵壓力不穩。應經(jīng)常觀(guān)察儲液器中流動(dòng)相的量，加足流動(dòng)相保證所有的樣品分析完畢。輸液管道上裝沉子沉至瓶底，儲液器蓋上留一小孔正好夾住進(jìn)液管，使其不能上下移動(dòng)。

過(guò)濾器阻塞引起管道和泵腔空化，壓力不穩。過(guò)濾器被微粒所阻塞或長(cháng)霉，去掉過(guò)濾器后如果系統運轉正常，說(shuō)明已找出問(wèn)題，換上新的過(guò)濾器則可。有時(shí)候換上新的過(guò)濾器仍然不暢，那就需要查查流動(dòng)相的制備過(guò)程，或者換大孔徑的過(guò)濾器。不管如何，流動(dòng)相都需要重新過(guò)濾。

流速過(guò)高、阻力大，造成空化現象，這是由于過(guò)濾器孔徑、管道內徑、流速和溶劑黏度等引起的。如果流速大于10mL/min，常會(huì )出現這種現象。

使用下列方法解決：

（1）使用低流速；

（2）換大孔徑的過(guò)濾器；

（3）增加進(jìn)液管道內徑；

（4）抬高或加壓儲液器；

（5）不用過(guò)濾器，但流動(dòng)相一定要先過(guò)濾；

（6）儲液器蓋子太緊，在儲液器內形成真空，打出的流動(dòng)相不連續。應松開(kāi)蓋子或留有1mm的縫隙；

（7）進(jìn)液管道阻塞或彎曲使泵抽不到液，注意調整進(jìn)液管道或更換新的。其它問(wèn)題包括滲漏或接頭松動(dòng)、泵部件損壞等，都能引起供液不正常。

流動(dòng)相和儲液器被污染

由于污染，噪音越來(lái)越大，檢測器基線(xiàn)上升。污染物可能被泵以穩定的濃度打入系統，而再以穩定的濃度流出來(lái)，所以在色譜圖中不出多余的峰。用梯度洗脫時(shí)弱流動(dòng)相可以使污染物聚在柱頂，流動(dòng)相強度增加后污染物可能被洗脫出來(lái)一個(gè)大的偽峰。有時(shí)基線(xiàn)噪音突然增大或突然提高，都是因為反復加進(jìn)新的流動(dòng)相或系統用得太久（通宵）所造成的。新加進(jìn)的流動(dòng)相有污染物或者流動(dòng)相長(cháng)霉，繁殖了細菌。

臟的儲液器會(huì )污染清潔的流動(dòng)相。每種流動(dòng)相備有專(zhuān)用的儲液器，或者定期報廢儲液器。

流動(dòng)相污染來(lái)自這幾個(gè)方面

試劑質(zhì)量不高，玻璃器皿不合格；

微生物的影響；

配制流動(dòng)相時(shí)操作不當等；

因此要求高純度化學(xué)試劑和HPLC級溶劑；

玻璃器皿按規定清洗干凈；

為防止微生物生長(cháng)，每天要用甲醇清洗系統；

懷疑系統內生長(cháng)了微生物，可用稀硝酸沖洗即可（注意不要損壞柱和管道系統）；

真空脫氣時(shí)防止泵油帶入流動(dòng)相；

用清潔的惰性塞子、攪棒、過(guò)濾器和玻璃器皿配制流動(dòng)相；

已經(jīng)污染的流動(dòng)相一定要廢棄掉。