更新更新時(shí)間:2021-08-09
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帶你詳細了解紫外可見(jiàn)分光光度計
上海連橋生物科技有限公司
紫外分光光度法是根據物質(zhì)的吸收光譜,來(lái)研究物質(zhì)的成分、結構和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外分光光度計可以在紫外可見(jiàn)光區任意選擇不同波長(cháng)的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(cháng)的光能量,相應地發(fā)生了分子振動(dòng)能級躍遷和電子能級躍遷的結果。
由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會(huì )相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線(xiàn),可根據吸收光譜上的某些特征波長(cháng)處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量。
紫外分光光度計用途
1.檢定物質(zhì)
根據吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是最大吸收波長(cháng)λ-max和摩爾吸收系數ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數。這在藥物分析上就有著(zhù)很廣泛的應用。在國內外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的最大吸收波長(cháng)和吸收系數載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。
2.與標準物及標準圖譜對照
將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見(jiàn)吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì),則兩者的光譜圖應*一致。如果沒(méi)有標樣,也可以和現成的標 準譜圖對照進(jìn)行比較。這種方法要求儀器準確,精密度高,且測定條件要相同。
3.比較最大吸收波長(cháng)吸收系數的一致性
4.純度檢驗
5.推測化合物的分子結構
6.氫鍵強度的測定
實(shí)驗證明,不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同,這可以利用紫外光譜來(lái)判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度,以確定選擇哪一種溶劑。
7.絡(luò )合物組成及穩定常數的測定:
8.反應動(dòng)力學(xué)研究
9.在有機分析中的應用
有機分析是一門(mén)研究有機化合物的分離、鑒別及組成結構測定的科學(xué),它是在有機化學(xué)和分析化學(xué)的基礎上發(fā)展起來(lái)的綜合性學(xué)科。
紫外分光光度計使用注意事項
1.溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素:
他們可以引起機械部件的銹蝕,使金屬鏡面的光潔度下降,引起儀器機械部分的誤差或性能下降;造成光學(xué)部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕,產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等,甚至儀器停止工作,從而影響儀器壽命。維護保養時(shí)應定期加以校正。使用紫外分光光度計應具備四季恒濕的儀器室,配置恒溫設備,特別是地處南方地區的實(shí)驗室。
2.環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體亦可以影響機械系統的靈活性、降低各種限位開(kāi)關(guān)、按鍵、光電偶合器的可靠性,也是造成必須學(xué)部件鋁膜銹蝕的原因之一:
因此,使用紫外分光光度計必須定期清潔,保障環(huán)境和儀器室內衛生條件,防塵。
3.紫外分光光度計儀器使用一定周期后,內部會(huì )積累一定量的塵埃,最好由維修工程師或在工程師指導下定期開(kāi)啟儀器外罩對內部進(jìn)行除塵工作:
同時(shí),將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固,對光學(xué)盒的密封窗口進(jìn)行清潔,必要時(shí)對光路進(jìn)行校準,對機械部分進(jìn)行清潔和必要的潤滑。最后,恢復原狀,再進(jìn)行一些必要的檢測、調校與記錄。分析儀器工作者要懂得儀器的日常維護和對主要技術(shù)指標的簡(jiǎn)易測試方法,自己經(jīng)常對儀器進(jìn)行維護和測試,以保證儀器工作在最佳狀態(tài)。
紫外可見(jiàn)分光光度計詳細操作流程及校準方法
1.紫外可見(jiàn)分光光度計光度測量
在模式選擇屏幕中選擇<1.Photometric光度>選項,將顯示參數配置屏幕;
用GOTOWL鍵設定測量波長(cháng);
按F2鍵設定進(jìn)樣控制;
按START/STOP鍵時(shí),測量開(kāi)始,顯示測量屏幕;
如需做空白校正,應在測量前先設置空白樣品,然后,按AUTO-ZERO鍵,將測量值置為OABS(100%);
2.紫外可見(jiàn)分光光度計校正
開(kāi)機預熱10分鐘足矣;
放入黑塊和標樣(沒(méi)有的自己配),關(guān)閉蓋子;
校0;
把燈光對著(zhù)黑塊,把透光度調0;
把燈光對標樣,將吸光度調到100%;
3參比溶液又稱(chēng)空白溶液。測量時(shí)用作比較的、不含被測物質(zhì)但其基體盡可能與試樣溶液相似的溶液。通常,用參比溶液掃描的曲線(xiàn)應是一條平坦的直線(xiàn)。有時(shí),基體中,雖不含被測物質(zhì),但含有別的物質(zhì),這時(shí)必須保證其不影響測試。經(jīng)常碰到的是試劑空白中含有被測物質(zhì),此時(shí)必須經(jīng)過(guò)純化將其除去。否則將影響測定結果。
4.紫外可見(jiàn)分光光度計使用注意事項
1.開(kāi)機前應先預熱15分鐘,然后開(kāi)機自檢;
2.濕度要控制在75%左右,溫度在5~30度之間;
3.儀器要穩壓電源,接地要好。并且避免陽(yáng)光直接照射;
5.常見(jiàn)故障及處理方法
光門(mén)不能*關(guān)閉:修復光門(mén)部件,使其*關(guān)閉;
透過(guò)率“100%"旋到底了。解決方法:重新調整“100%"旋鈕;
儀器嚴重受潮:可打開(kāi)光電管暗盒,用電吹風(fēng)吹上一會(huì )兒使其干燥,并更換干燥劑;以上為紫外可見(jiàn)分光光度計的具體操作方法及使用注意事項,希望能給予您幫助;
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